IGF-1 ELISA

1.kriteria obes
15 http://www.4woman.gov/hearttruth/pdf/obesity_metabolic.pdf
2.rumus sampling
(p -1) (n – 1) = 15
3 (n – 1) = 15
n – 1 = 5
n = 6
3. elisa
Coating Antigen 1:20, overnight T 4o

Cuci dengan PBS-T 0.2% 3 kali @ 3 menit

Blocking dengan BSA 1% 30 menit

Cuci dengan PBS-T 0.2% 3 kali @ 3 menit

Antibodi primer 1:500 dalam PBS, inkubasi 1 jam

Cuci dengan PBS-T 0.2% 3 kali @ 3 menit

Antibodi sekunder IgG biotin antirabbit 1:1000, inkubasi 1 jam

Cuci dengan PBS-T 0.2% 3 kali @ 3 menit

SA-HRP 1:1000, inkubasi 1 jam

Cuci dengan PBS-T 0.2% 3 kali @ 3 menit

Tambahkan sureblue TMB, inkubasi 30 menit

Stop reaksi dengan HCl 1 N, inkubasi 15 menit

Baca dengan ELISA reader (dengan absorbansi 492 nm)

4.dosis 2, 10, 50 mg/kgBB/hari
5. IGF-1
faktor genetik
Status aktivitas fisik
Stres
Penyakit
Ras
Status estrogen


--
Shigenoi Haruki