Linkbucks

Friday, March 05, 2010

ELISA

Coating Antigen 1:20, overnight T 4o

Cuci dengan PBS-T 0.2% 3 kali @ 3 menit

Blocking dengan BSA 1% 30 menit

Cuci dengan PBS-T 0.2% 3 kali @ 3 menit

Antibodi primer 1:500 dalam PBS, inkubasi 1 jam

Cuci dengan PBS-T 0.2% 3 kali @ 3 menit

Antibodi sekunder IgG biotin antirabbit 1:1000, inkubasi 1 jam

Cuci dengan PBS-T 0.2% 3 kali @ 3 menit

SA-HRP 1:1000, inkubasi 1 jam

Cuci dengan PBS-T 0.2% 3 kali @ 3 menit

Tambahkan sureblue TMB, inkubasi 30 menit

Stop reaksi dengan HCl 1 N, inkubasi 15 menit

Baca dengan ELISA reader (dengan absorbansi 492 nm)

Coating antigen (14-7-09)
1 : 20, Vtotal 200 mikroliter?
Buffer (PBS?) ph 9.6 = 190
Sampel (antigen) = 10
Dikocok?
Masukkan microtiter plate
Inkubasi overnight (? Jam) dengan suhu 4oc


--
Shigenoi Haruki

No comments:

Post a Comment